高效液相谱法测定酱油中苯甲酸的含量

高效液相谱法测定酱油中苯甲酸的含量
  摘要:本文采用高效液相谱法测定酱油中防腐剂苯甲酸的含量。根据苯甲酸的性质选择分离分离谱柱为 C18(4.6mm×250mm,粒径5μm)柱,流动相为乙酸铵-甲醇(91:9),流速1mL/min,柱温30℃。当波长为230 nm时测得苯甲酸标准溶液的浓度与峰面积的线性关系良好,线性回归方程为y=3063.46746x+0.4971,r2 = 0.9998。一般实验要求加标回收率为90%-110%,苯甲酸检出限量为1g/kg。实验测得加标回收率为96%-98%,三个样品的苯甲酸含量分别为0.39g/kg、0.50g/kg、0.81g/kg,均符合食品安全国家标准。本实验方法简单快捷,准确度,灵敏度也均达到国家相关分析要求,适用于测定酱油中苯甲酸的测定。
关键词:高效液相谱;酱油;防腐剂;苯甲酸
 
        为了减少防腐剂对人类带来的负面影响,对防腐剂进行一定的分析研究是很有必要的。针对同一防腐剂的检测,不同的检测技术其特异性和快速性等也各有不同。国家食品检测标准GB/T5009.29-2003《食品中山梨酸、苯甲酸的测定》介绍了三种检测苯甲酸的方法,分别是气相谱法、高效液相谱法和薄层谱法。此外据网上报道,可用于检测酱油中苯甲酸
含量的方法还有紫外分光光度法、毛细管电泳法等。因高效液相谱法精确度高、简单、快速,是现阶段测定苯甲酸含量的首选。现重点介绍高效液相谱法测定酱油中的苯甲酸。
        实验主要试剂及设备:
        甲醇(GR);乙酸铵(GR);苯甲酸钠标准品(GR);乙酸锌(AR);亚铁(AR);氨水(≥99.0%)。
        高效液相谱仪(LC-20ADRF);电子分析天平(BSM--120.4);超声波清洗仪(SG5200HDT);高速离心机(TGL-16G-A)。
        谱条件:
        以C18柱(4.6mm×250mm,粒径5μm)为谱柱;以A相1.54mg/mL乙酸铵溶液+B相甲醇溶液(91:9)为流动相;柱温:30℃;进样量:10μL;流速:1.0 mL/min;检测波长为230nm;检测器为紫外吸收检测器。
        一、样品分析
        1.样品中苯甲酸含量的测定
        精确称取酱油2.0g,置于具塞塑料离心管中,样品称取质量为2.0135g。样品称量后,
加水至30mL,再加1mL亚铁溶液(10.6%)和1mL乙酸锌溶液(21.9%),混匀。用(1+1)氨水调pH至中性,再用超纯水定容至40mL。盖好管塞,在高速离心机中离心至沉淀完全,清液经微孔滤膜(4.5um)过滤,滤液在超声波清洗仪超声后注入谱进样瓶中,按谱条件中所述上机检测、分析。
        酱油样品中苯甲酸含量的计算公式:
        式中:
        y--酱油样品中苯甲酸组分含量,单位为克每千克(g/kg);
        c--由苯甲酸溶液标准曲线得出的样液中苯甲酸的浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL);
        v--样品定容体积,单位为毫升(mL);
        m--样品质量,单位为克(g)。
        按照相关实验要求,同一实验室内两次独立测定结果的绝对差值应不超过算术平均值的10%,计算结果保留两位有效数字。
        2.重复性实验
        准确称取酱油样品5份于5支具塞塑料离心管中,样品称取质量分别是2.0129g、2.003
6g、2.0437g、2.0152g、2.0082g。按上处前处理方法处理制得样品进样溶液,将制得样液注入谱进样瓶中,将样品放入液相谱仪依次进样测定,检测实验的重复性。
        3.加标回收实验
        准确称取4份酱油样品于4支具塞塑料离心管中,样品称取质量分别为2.0736g、2.0018g、2.0132g、2.0537g。称取样品后向4支离心管中分别加入1mg/mL的苯甲酸标准溶液0.5mL、1mL、1.5mL、2mL,充分混合后,按照样品前处理方法处理,将样品放入液相谱仪检测加标样品的苯甲酸含量,并计算其加标回收率。
        二、结果与讨论
        样品苯甲酸含量文具盒生产过程
        将样品处理液和0.1mg/mL的苯甲酸标准溶液分别注入谱进样瓶中,再依次送入仪器,通过高效液相谱仪进行分离检测。并以苯甲酸标准溶液的峰的保留时间为依据定性,以其峰面积为依据定量,求出样液中苯甲酸含量,供计算。
1.苯甲酸标准溶液谱特征
 
 
 
图 酱油样液谱图
 
改锥头        通过上图可知,酱油样液在保留时间为10.433min处有峰出现,峰面积为126.9773,该峰是苯甲酸峰,酱油中的苯甲酸浓度为0.041mg/mL。
        根据我国国家卫生部发布的相关规定,酱油中苯甲酸含量不得高于1g/kg。通过以上实验数据,计算酱油样品的苯甲酸含量,其苯甲酸含量为0.81g/kg。故酱油的苯甲酸含量符合食品安全国家标准。
        3.重复性实验结果
        酱油的峰面积分别为126.8773、122.0851、127.1335、128.3456、126.3277,酱油中的苯甲酸浓度分别为0.041、0.040、0.042、0.041、0.041mg/mL。计算结果显示,酱油样品中防腐剂苯甲酸的平均含量为0.812g/kg,重复实验两两之间的绝对差值均低于算术平均值的10%,RSD=1.030%,低于2.0%。实验证明,使用本方法测定酱油中苯甲酸含量重复性良好,结果准确可信。
        4.加标回收实验结果蛋白质晶体
酱油加标0.0125mg/mL
温度自动控制系统 
 
 
酱油高浓度加标谱图
 
机票查询接口        通过上图可知,酱油高浓度加标样液在保留时间为10.411min处有峰出现,峰面积为197.4737,该峰是苯甲酸峰,该样液的苯甲酸浓度为0.065mg/mL。
        根据实验所得数据,检出浓度分别为0.053、0.065、0.078、0.091mg/mL,计算不同加标水平下苯甲酸的加标回收率,回收率分别为95.92%、98.13%、98.68%、98.36%。
        实验要求,加标回收实验的回收率应该在90%-110%之间。根据数据可知,本实验不同加标水平的加标回收率都满足一般实验要求,说明该实验方法是准确可靠的。
        4.结论
        通过高效液相谱法检测不同酱油样品的苯甲酸含量,实验测得三个酱油样品的苯甲酸含量分别为0.39g/kg、0.50g/kg、0.81g/kg。国家卫生部发布的GB2760-2014《食品安
全国家标准,食品添加剂使用标准》规定酱油中苯甲酸含量不得高于1g/kg,故三种酱油的苯甲酸含量均符合食品安全国家标准。将同一酱油样品在相同谱条件下进行多次检测,重复性实验的RSD=1.030%<2%,证明实验重复性良好。通过加标实验,在不同加标浓度下,测得苯甲酸的回收率都在90%-110%之间,回收率符合一般实验要求。综上所述,该实验方法的系统误差小,精确度高,结果较为可靠,完全满足国家质量监督和卫生部门的检验要求。本实验方法样品前处理简单,测定速度快,结果准确可靠,也可用于汽水,配制酒类中苯甲酸含量的检测。
 
 
爆破玻璃 

本文发布于:2023-06-15 20:15:37,感谢您对本站的认可!

本文链接:https://www.17tex.com/tex/3/140040.html

版权声明:本站内容均来自互联网,仅供演示用,请勿用于商业和其他非法用途。如果侵犯了您的权益请与我们联系,我们将在24小时内删除。

标签:酱油   样品   实验   含量   加标   检测   测定   色谱
留言与评论(共有 0 条评论)
   
验证码:
Copyright ©2019-2024 Comsenz Inc.Powered by © 易纺专利技术学习网 豫ICP备2022007602号 豫公网安备41160202000603 站长QQ:729038198 关于我们 投诉建议