Agilent 1260高效液相谱仪操作规程

1、目的
确保Agilent 1260高效液相谱仪的正确使用及管理。
2、范围
研发分析中心实验室Agilent 1260高效液相谱仪。
3、责任
仪器使用者对本标准的实施负责。
4、内容
4. 1 开机
4.1.1打开计算机,进入Windows  画面。
4.1.2自下而上打开1260LC各模块电源,待各模块自检完成后,双击电脑桌面上LC1260-1(Online)图标,化学工作站自动与1260LC通讯,进入工作站画面。
4.1.3单击【View】菜单选择Method and Run control】项,也可单击工作站
画面左下角【Method and Run control】项,进入方法和运行控制窗口。
  4.2  安装谱柱
正确安装实验所需的谱柱,注意谱柱流速箭头方向,试验过程中需检查是否存
在漏液。
4.3  溶剂瓶体积设置
把事先配好的流动相倒入相应的溶剂瓶中,单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下【Bottle filling】,在参数设置处输入各溶剂瓶(ABCD)内溶液实际体积和停泵体积,单击【OK】键,即可。
4.4 设置【Seal wash
单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下control, 在seal wash这栏中选择“On”, 清洗功能开始运行,并设置清洗时间,每隔5min清洗0.1min。
4.4  脱气
逆时针旋开Purge阀,单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下control,
pump这栏中选择“On”,泵开始运行。设置“solvents”一栏中相应参数,将试验
中所用到的管道逐一脱气,直至管内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止所需时间,
3ml/min冲洗大约需5min~10 min ,,完成后选择off , 单击OK键关泵,顺时针旋
紧Purge阀。 
4.5 平衡谱柱 
单击【instrument】菜单,选择【Set up Instrument Method】项下 Quat Pump, 在
“solvents”一栏将试验中要用到的有机相通道(甲醇/乙腈)设置为100%,并将
Flow”从低流速逐级设为1ml/min, 在pump翻转气缸这栏中选择“On”,泵开始运行,冲
洗约10min钟后,设定与测试方法相同的柱流速和流动相比例平衡谱柱(梯度采
用起始流动相比例),炭材料工程技术冲洗谱柱,直至基线走平,一般需要30 min ~60 min。若
测试方法用到缓冲盐作为流动相,还需10%甲醇或乙腈水溶液冲洗过渡谱柱,
30min,再设置为流动相得比例,平衡谱柱。
  4.5 方法编辑
    4.5.1  进样体积设定
    标准进样: 单击【instrument】菜单,选择【Set up Instrument Method】,在此窗口上方选择Sampler模块, 在“Injection Volume”处输入进样体积,选择“Standard  Injection”方式,单击OK键即可。
    带洗针进样:单击【instrument】菜单,选择【Set up Instrument Method】, 在此窗口上方选择Sampler模块, 在“Injection Volume”处输入进样体积,选择“Injection with needle wash”方式,单击OK键即可。此方式进样后会在事先放置的洗瓶中洗针,减少样品残留此种方式比较,比较适合
    4.5.2 柱温设定
    单击【instrument】菜单,选择【Set up Instrument Method】,此窗口上方选择 “column” 模块,输入柱温,左右两边柱温要保持一致。
4.5.3 泵参数设定
单击【instrument】菜单,选择【Set up Instrument Method】,在此窗口上方选择 “Quat Pump” 模块, 在“Flow”处输入所需的流速,在“solvents”处输入各通道的溶液比例,若实验为梯度洗脱程序,则需在“Timetable”下编辑,输入相应的时间和流动相比例。“Stoptime”为运行停止时间,声纳探鱼器“Posttime”指的是两次运行之间流动相的平衡时间,一般剃度洗脱需设置这一项。
4.5.4 检测波长设定
隔热断桥铝型材单击【instrument】菜单,选择【Set up Instrument Method】,在此窗口上方选择“DAD”模块,输入检测波长和带宽,一般带宽设置为4nm,参比波长视情况设定,一般不需要设定。
4.5.5 样品信息设定
单针进样:单击【Runcontrol】菜单,选择【Sample info】,在弹出窗口Path
处输图谱保存路径;“subdirectory”处输入文件夹;prefix/counter处输入图谱编号;prefix为前缀,输入年月日;counter为计数,从“00001”开始;Sample parameters下的“location”处输入进样瓶放置位置;Sample name处输入样品名称。
多媒体网络中控
序列进样:单击【Sequence】菜单,选择【Sequence parameters】,在弹出窗口DataFilePath处输入图谱保存路径,“subdirectory”处输入文件夹,prefix/counter处输入图谱编号,prefix为前缀,输入年月日,counter为计数,从“00001”开始。保存路径设置好后,单击【Sequence】菜单,选择【Sequence Table】,在“Vial”输入进样瓶位置;“Sample name”输入样品名称,可调式电热板Method name输入方法名称,inj/vial输入进样次数,【Cut】删掉所选中行,点击【OK】,退出当前界面,待基线系统稳定后,再点击运行界面上【Sequence】,仪器则开始按照当前设置好的系列进行样品检测。
4.5.6 方法保存
单击【Method】菜单,选择【Save Method】,即可保存当前方法;选择【Save Method as】,即可另存方法。
4.6 方法运行
单针进样:单击【Runcontrol】菜单,选择【Run Method】。
序列进样:单击【Runcontrol】菜单,选择【Run Sequence】。
4.7 图谱处理(不详细说明)
4.8 关机
    4.8.1 冲洗谱柱
做完试验,及时用适当溶剂冲洗柱子,特别是流动相中含有缓冲盐,一定要用足量的水冲洗彻底洗净其中的盐类,如先用甲醇或乙腈10%的水溶液冲洗不少于30分钟,再用100%甲醇或乙腈冲洗冲洗系统约30分钟,然后关泵,尽量保存在乙腈中(适用反相谱柱)。
4.8.2 关闭计算机
退出化学工作站,用shut down关闭计算机。
4.9 维护保养
4.9.1旋开【Purge】阀脱气时,查看柱前压力,若大于5Bar,则应更换过滤白
头,不过实际中,除非过滤白头已经很脏,一般都不会大于5 Bar,但是还是需定期更换。
4.9.2所使用的蒸馏水需当天开瓶的,才可以配流动相。
4.9.3仪器运行时需打开【Seal wash】清洗,防止高压盐析和推杆与泵之间的摩
擦。
4.9.4长期不用的通道,需定期冲洗,防止管道内液体干涸,产生气泡。

本文发布于:2023-06-15 20:30:38,感谢您对本站的认可!

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