寻常型银屑病患者Th17IL-17及Treg水平的检测意义研究 朴莉玲张春韶唐妮张弘
（深圳市龙岗中心医院，广东深圳518116）
【摘要】目的探究寻常型银屑病患者Th17、IL-17及Treg水平的检测意义。方法筛选深圳市龙岗中心医院2016年1月—2020年6月收治的50例寻常型银屑病患者，将其设为观察组，并根据病理变化将观察组分为静止期（29例）和进行期（21例），纳入同期来院体检的50例健康者设为对照组，比较外周血Th17/Treg细胞数量、寻常型银屑病患者和正常人的外周血Th17/Terg与IL-17/IL-10水平。结果观察组的外周血Th17/Terg各项水平与对照组相比具有明显差异（P<0.05），并且，进行期和静止期患者的外周血Th17/Terg差异明显（P<0.05）。观察组的外周血IL-17/IL-10水平与对照组具有明显差异（P<0.05）。结论寻常型银屑病患者的外周血Th17、IL-17及Treg水平均呈高表达，对于病情诊断及评估具有一定作用。 【关键词】寻常型银屑病Th17IL-17Treg
中图分类号：R4文献标识码：A
文章编号：1672-1721（2021）07-0959-03
DOI：10.19435/j.1672-1721.2021.07.034
银屑病（psoriasis，PS）是一种临床表现为鳞屑和红斑等的自身免疫性皮肤疾病，目前尚未明确发病的途径和机制，随着近年环境污染不断严重，其发病率也居高不下，Erden A等[1]认为免疫系统的刺激导致PS患者产生细胞相应变化的直接原因，特别是局灶性皮损的T淋巴细胞，PS的疾病特征在于Th1-Th17和Th2炎症轴不平衡，并且涉及如IL、TNF、干扰素IFN等多种细胞因子；临床上认为PS的关键驱动因素在于IL-23/Th17免疫轴，是其核心的发病机制，而IL-23可以调控Th17细胞，其分泌出的IL-17和TNF具有先天的免疫效应，在PS异常免疫反应的发病机制中，Th17细胞及其有效的细胞因子IL-17A具有重要作用[2]。本研究旨在探讨寻常型银屑病患者Th17、IL-17及Treg水平的检测意义，报告如下。
1资料与方法
1.1一般资料选取2016年1月—2020年6月收治的50例寻常型银屑病患者，将其设为观察组，纳入同期来深圳市龙岗中心医院体检的50例健康者设为对照组（根据病理变化分为静止期29例，进行期21例）。观察组男30例，女20例，年龄21~62岁，平均年龄（4
2.52±
3.62）岁。对照组男28例，女22例，年龄23~62岁，平均年龄（48.67±5.65）岁。本次临床研究经院伦理委员会批准通过，2组患者基线资料无明显差异（P>0.05），可以进行对比。
bazo1.2纳入和排除标准纳入标准：①所有患者均未患有系统性疾病。②4周以内未接受过免疫抑制剂。③患者均知晓研究内容，自愿参加。④2周以内未接受过外用药物。
排除标准：①存在严重的心血管疾病。②患者伴有精神病和恶性肿瘤。③中途退出者。
1.3方法Th17细胞检测：采取3mL的静脉血，肝素抗凝，采取PBS等体积稀释，用人淋巴细胞分离液获取外周血单一核细胞（PBMC），RPMI1640调整细胞浓度到2×106/mL。在24孔板上接种后，加入50μg/L佛波酯、1μmol/L的离子霉素和500μg/L的莫能霉素，放置在37℃、5%的CO2细胞培养箱中培养4h。根据收集的数据进行计数分别为同型对照管和测定管，再加入20μL PE标记的鼠抗人CD4单抗，4℃避光孵育30min。PBS洗涤2次，固定液室20min避光固定反应后，实施离心弃去上清后采取细胞因子染。PBS洗涤2次。采用破膜剂行细胞打孔，帮助细胞因子染，测定管中加入FITC标记的0.5μL的IL-17A，对照管加入同型对比，4℃避光孵育30min，采用流式细胞仪，淋巴细胞根据前向散射光和侧向散射光设门，各通道之间的荧光补偿设置完毕后，检测TH17的细胞比例[3]。
惠尚学
CD4CD25Treg细胞检测：检测时采取3mL抗凝全血，加入PE标记的鼠抗人CD4单抗和20μL的FITC标记的鼠抗人CD25抗体，同型对照为lgGI-PE和lgGI-FITC。混匀后，避光15min，再加入1mL红细胞裂
解液，放置37℃孵育10min。离心弃去上清，PBS洗涤3次后采用流式细胞仪检测。
IL-17和IL-10检测：采集患者和正常人的血清，在-70℃冰箱进行存储，最后统一开展检测，严格根据ELISA检测试剂盒说明。
1.4观察指标比较外周血Th17/Treg细胞数量，寻常型银屑病患者和正常人的外周血Th17/Terg与IL-17/IL-10水平。
①寻常型银屑病患者组与健康体检组外周血CD4+T淋巴细胞及皮损中：Western Blot法分析miR-124、STAT3、IL-25、IL-17的表达。②寻常型银屑病患者组与健康体检组外周血Th17细胞相关细胞因子：Elisa法分析IL-17、IL-6、IL-22的表达。③miR-124通路阻断IL-25自分泌循环对Th17细胞分化情况：miR-124agomir和antagomir试剂转染CD4+T淋巴细胞后，并与添加STAT3抑制剂C188-9干预组比较。经IL-6、TGF-β、抗小鼠IL-4抗体和抗小鼠IFN-γ组合诱导CD4+T淋巴细胞向Th17细胞分化。流式细胞检测各组Th17细胞数目。Elisa法分析各组细胞上清液中IL-17、IL-6、IL-22的表达。Western Blot 法分析Th17细胞中STAT3、IL-25、IL-17的表达。
1.5统计学方法以SPSS21.0统计学软件分析数据，计
作者简介：朴莉玲，女，硕士，主治医师。
表2
2组患者的外周血IL-17/IL-10水平对比（x ±s ）
例数IL-17（μg/L ）IL-10（μg/L ）IL-17/IL-105048.83±5.5024.75±4.83 3.17±0.7950
90.66±29.60
18.79±4.29 6.79±4.209.825 6.524 5.990<0.001<0.001<0.00121118.96±15.5915.26±3.299.82±2.462969.65±18.1221.53±3.99 3.58±1.2614.5878.57315.964<0.001
<0.001
<0.001
组别对照组观察组t P 进行期静止期t P
2.22组患者的外周血IL-17/IL-10水平对比
观察组IL-17为（90.66±29.60）μg/L ，IL-10为（18.79±4.29）μg/L ，
IL-17/IL-10为（6.79±4.20），与对照组差异具有统计学意义（P <0.05）。见表2。
量资料以x ±s 表示，采用t 检验，计数资料以百分比表示，采用字2检验，P <0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1
2组患者的外周血Th17/Treg 细胞数量比较
外周血Th17/Terg 表达：PS 患者Th17为（0.85±0.26）%，CD 4CD 25Treg 为（3.64±1.15）%，Th17/Treg 为（0.95±0.75）%，与对照组相比差异，具有统计学意义（P <0.05）。并且，进行期和静止期患者的
外周血Th17/Terg 表达差异具有统计学意义（P <0.05）。见表1。
表1
2组患者的外周血Th17/Treg 细胞数量比较（x ±s ）
例数Th17（%）CD 4CD 25Treg （%）Th17/Treg 500.85±0.267.88±1.250.13±0.0550
2.71±1.42
3.64±1.150.95±0.759.11117.6517.714<0.001<0.001<0.00121
4.19±0.70 2.70±0.55 1.66±0.6329 1.56±0.41 4.36±0.940.41±0.2222.92410.77813.246<0.001
dna探针<0.001
<0.001
组别对照组观察组t P 进行期静止期t P
3讨论PS 属于临床上的自身免疫性皮肤病，分为寻常型、脓包型、关节型和红皮病型，其中99%为是寻常型PS ，目前全世界范围内患者高达1.25亿。该病的病程较长并且较为困难，对于患者的工作生活和身心健康造成了长期严重影响[4]。主要临床特征为皮损明显，并且具有境界清楚和厚层、银
白鳞屑性的斑块。目前临床上的普遍观点认为其为一种与多种疾病存在关联性的系统性疾病，其关联疾病为炎症性肠病、非酒精性脂肪肝、血脂异常、肥胖和心血管疾病等，目前发病机制不明。
目前倾向于多种因素共同作用下诱发了该病，其中包括环境因素、遗传因素和免疫紊乱等，该病发病过程中以T 细胞为主的免疫异常系统尤为关键，特别是CD 4+T 细胞。有临床研究中发现，在研究前期监测PS 患者血清中IL-4、IL-8、TNF-α和T 细胞亚水平，能够帮助医师合理判断患者的预后水平。并且，有研究认为PS 的Th1与Th2细胞平衡失调中，以Th1型反应占据绝对优势，并且其分泌的效应细胞因子INF-γ严重影响着PS 的发病机制
[5]
。但是Th17细胞作为一种新型的独立
CD 4+T 细胞亚提出了不一样的说法，其认为Th17的生物学效应，主要通过分泌IL-17、IL-6、IL-22和TNF-α等细胞因子发挥作用
[6]
。清华大学免疫所的董晨教授近期在课题组的
Immunity 杂志上对于IL-17的家族因子之一的IL-25进行了有关报道，表明PS 的皮肤和小鼠模型中的高表达也会受到其IL-17的特异性调节[7]。并且在有关机制的进一步研究中，临床发现受体会因为IL-25刺激而产生酪氨酸磷酸化，进而对STAT3产生直接激活作用，其无疑是一种PS 发病过程中IL-25所介导的皮肤中自分泌机制循环，为明确PS 发病机制提供于新视角。
本次研究中，分别就健康人和银屑病患者展开研究分析，结果显示：观察组的外周血Th17/Terg 各项水平与对照组相比具有明显差异；并且，进行期和静止期患者的外周血Th17/Terg 差异明显。观察组的各项外周血IL-17/IL-10表示水平均与对照组具有显著差异。说明Th17/Terg 和IL-17/IL-10水平与PV 患者的关联性较强。有临床研究发现，在PS 患者的皮损中IL-17mRNA 以及Th17细胞相关因子IL-23p19，IL-23p40，IL-6mRNA 含量均显著高于患者的无皮损区域，并且这些患者无皮损区域的细胞因子所含有的mRNA 显著高于正常受试者的皮肤组织。又有临床研究检测表明，22例外周血Th17细胞比例高的PS 患者接受依那西普和利息单抗后，血清IL-17水平和Th 细胞比例显著降低[8]。而在本次研究中也发现，PS 患者外周血Th17细胞比例和血清IL-17水平较正常人显
荒芜了的花园阿替普酶溶栓在急性脑梗死中的应用效果分析
李久全
（沈阳维康医院，辽宁沈阳110021）
著升高，并且进行期相较于静止期更高。综合研究数据表明，PS 患者的外周血和皮损组织中都存在相关因子和Th17细胞增多的现象，提示PS 发病中Th17细胞的重要作用。
综上所述，寻常型银屑病患者外周血Th17、Treg 、IL-17和IL-10表达与其病情发展程度有密切关联性。
参考文献
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粥样硬化中血管内皮细胞的生物学特性[J].中国老年学杂志，2019，39（1）：166-170.
（收稿日期：2020-12-15）
【摘要】目的分析急性脑梗死采用阿替普酶溶栓的效果。方法于2019年10月—2020年10月期间选取沈阳维康医院收治的急性脑梗死患者74例，按照方法的不同分为2组，对比组采用非静脉溶栓，试验组实施阿替普酶静脉溶栓。对比2组总有效率、神经功能缺损情况、生活质量。结果
试验组总有效率97.89%，高于对比组的70.27%
（P <0.05）；后试验组美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS ）评分为（5.84±0.72）分，Barthel 指数（BI ）评分为（72.23±7.53）分，均明显优于对比组的（10.03±1.15）分、（54.57±6.47）分（P <0.05）。结论
急性脑梗死采用阿替普酶溶栓的
效果显著，可改善患者的神经功能，提高生活质量。
【关键词】急性脑梗死静脉溶栓
阿替普酶
临床效
果
中图分类号：R4
文献标识码：A
文章编号：1672-1721（2021）07-0961-02DOI ：10.19435/j.1672-1721.2021.07.035
伴随我国老龄化问题的日益加剧，老年人中常见病的发病率不断增加。急性脑梗死作为一种常见的老年性疾病，最近几年的发病率显著提高，该病主要是由于局部突发血液循环障碍，引发脑组织出现缺氧缺血使脑细胞凋亡，导致神经功能缺损，具有较高的致残率与致死率[1]。脑梗死的临床原则为短时间内使闭塞血管再通，缺血脑组织重新得到血流灌注，最大限度恢复缺血半暗带的脑细胞功能，进而使患者的致残率与病
死率降低[2]。溶栓为目前临床上惟一针对脑梗死病因进行的干预措施，作为第二代溶栓药物，阿替普酶静脉溶栓在多个国家的缺血性脑血管疾病指南中均得到Ⅰ类推荐，为了进一步探究其对急性脑梗死的效果，本研究选取74例患者进行了临床对比观察，报道如下。
1资料与方法1.1
一般资料
于2019年10月—2020年10月期间选
取沈阳维康医院收治的急性脑梗死患者74例，患者及家属知情同意，年龄<80岁，NIHSS 评分在2~20分之间，发病至入院时间<4.5h ，经医学伦理委员会批准；排除CT 或MRI 检查显示为大面积脑梗死或脑出血患者，伴随严重心肝肾功能不全以及活动性出血倾向者，伴颅内动脉瘤或动静脉畸形，2个月内曾实施过较大的外科手术患者。按照方法的不同分为2组，对比组37例，男21例，女16例；年龄56~78岁，平均年龄（67.52±11.74）岁，平均发病至入院时间（3.42±0.33）h 。试验组37例，男22例，女15例；年龄57~79岁，平均年龄（68.47±11.65）岁，平均发病至入院时间（3.70±0.38）h 。2组基线资料无明显差异（P >0.05）。
1.2
方法
对比组采用非静脉溶栓，300mg 阿司匹
林（辰欣药业股份有限公司，国药准字H20113013）口服，每天1次，连续7d 后改为100mg/d ，每天1次；30mg 依达拉奉（湖南五洲通药业有限责任公司，国药准字H20193377）注射液静脉滴注，每天2次。试验组实施阿替普酶（Boehringer Ingelheim Pharma GmbH Co.KG ，进口药品注册证号S2*******）静脉溶栓，0.9mg/kg （以90mg 为剂量上限），
作者简介：李久全，男，本科，主治医师。
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